血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中,以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%:白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白,浓度为50mg/ml,约占总蛋白质量的一半。胎牛血清,是胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。常州RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
为什么使用胎儿血清而不是新生儿血清或成人血清?胎儿血清含有较多的生长因子,丙种球蛋白(即抗体)含量较低,非胎儿血清也有。这些很重要,因为生长因子促进细胞存活和增殖,而抗体可以与培养的细胞结合。此外,与成人或新生儿相比,胎儿血清中的补体蛋白(补体)含量较低。这些补体具有溶解培养细胞和干扰免疫测定的不良作用。血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。常州RPMI 1640培养基(无硝酸钙)胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集时间早,其胎球蛋白较多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量极低,并富含多种生长因子,因此,是培养细胞更为优良的牛血清。牛血清的成分复杂,主要包含蛋白质、多肽、元素、氨基酸、葡萄糖等多种营养成分。虽然其中大部分成分已为人知,但还有一部分也还不清楚,而且其组分及含量常依动物性别、年龄、生理状态、营养条件不同而有差异。血清理含有促进细胞生长的成分外,同时含有内有害元素、血色素、补体、抗体等其他有害成分,影响细胞生长甚至导致细胞死亡,因此,通常需要测试工作才知道对细胞生长的效果。低质量的血清常被病毒、菌体和支原体等微生物传染,导致细胞培养失败,浪费了科研人员的时间和精力。胎牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基。
胎牛血清的生产和质控也是影响产品品质的重要因素。胎牛血清生产流程可分为原料采集、原料加工及冷链运输三个重要环节。生产过程中的每一步,如血源采集、加工、过滤、辐照处理、包装、质检和物流等,都必须遵循行业高标准,以确保产品的优异品质。一个符合业内标准的血清生产流程是这样的:在严格规范的健康与检疫监控下,怀孕母牛从牧场运输到屠宰场,胎牛经心脏穿刺取血,得到胎牛血清原料;新生牛和小牛血清则取自出生相应天数的牛血液。按照国际标准,血清生产需经过多级预过滤和三级0.1μm精过滤,以去除包括支原体在内的各种微生物与杂质。生产后的血清需经过严苛的质检环节,得到合格成品后,保存和运输环节也要严格遵循相关要求。胎牛血清应该存放在-20℃环境的地方。昆山DMEM/F12
胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。常州RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
胎牛血清保存方法:1、需要长期保存的澳洲牛血清,例如澳洲南美胎牛血清,必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现澳洲牛血清有悬浮物,例如澳洲北美胎牛血清中发现有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。常州RPMI 1640培养基(无硝酸钙)
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